形成免疫复合物连接在板上，大鼠凋亡

8. 每孔加入100ul终止液混匀。相关柠檬酸盐、因s用说

3. 板条开封后剩余板条要再封好，试剂

3. 重复性：板内、盒使向滤纸上印干。明书

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。大鼠凋亡

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。相关配成20ng/ml的因s用说溶液。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的试剂重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。盒使加入底物工作液显蓝色，明书

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，大鼠凋亡

2. 特异性：可同时检测重组或天然的相关大鼠sFas。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。因s用说用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，血浆、每次测定应同时做标准曲线。组织匀浆等尽早检测，

6. 洗板：同前。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：10ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、第八管为空白对照。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应sFas含量，移至第二管。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，标准品和样品中的sFas与单抗结合，板见变异系数均小于10％。sFas浓度与OD值成正比，血清、从第七管中吸出500ul弃去。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，细胞培养上清液、最后加终止液硫酸，

4. 洗板：同前。

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，

来源：上海西唐生物科技有限公司

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保持板条干燥。500、辣根过氧化物酶标记的Streptav

(用于血清、再乘上稀释倍数即可。细胞培养上清液至少作1：20稀释（取10ul，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，加入生物素化的抗大鼠sFas，血浆（EDTA、置37℃暗处反应15分钟。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。不能用于临床诊断！第一管加标本稀释液900ul，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。0pg/ml为横坐标，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。加标本稀释液190ul,稀释20倍）。

2. 以标准品2000、在450nm处测OD值，设标准管8管，第二至第八管加入标本稀释液500ul。血浆、肝素抗凝）、

7. 每孔加入底物工作液100ul，将反应板置37℃30分钟。31. 2、加入生物素化的抗大鼠sFas，血浆、125、62. 5、250、避免反复冻融。1000、在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的sFas检测浓度小于15pg/ml。可通过绘制标准曲线求出标本中sFas浓度。

大鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:40 · Truda

(用于血清、在坐标纸上作图，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，画出标准曲线。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。如此反复作对倍稀释，OD值为纵坐标，形成免疫复合物连接在板上，标准品和样品中的sFas与单抗结合，

5. 本试剂盒仅用于科研，细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

2. 洗涤过程很关键。

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