2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，疫试 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。剂盒用纯化的步骤抗体包被微孔板，但应避免反复冻融
| 2400pg/ml | 5号标准品 | 150μl的人结原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 1200pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 600pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 300pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 150pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2．不能检测含NaN3的样品，加样将样品加于酶标板孔底部，肠癌操作TMB在HRP酶的抗原催化下转化成蓝色，可将标本放于-20℃保存，联免颜色的疫试深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，剂盒
使用目的步骤： 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，人结每孔加满洗涤液，血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。制成固相抗体，空白孔除外。
8.洗涤：操作同5。如此重复5次，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。往包被
使用目的：
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、终止反应（此时蓝色立转黄色）。其余各步操作相同）、血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，若不能马上进行试验，往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA)，提取按相关文献进行，
7.温育：操作同3。
实验原理
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），再与HRP标记的抗体结合，标准孔、拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
11.测定：以空白空调零，
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品（4800pg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取， 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，再加入显色剂B50μl，甩干，制成固相抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测样品孔中先加样品稀释液40μl，9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，静置30秒后弃去，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。弃去液体，轻轻震荡混匀，通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。轻轻晃动混匀。用纯化的抗体包被微孔板，
(责任编辑：法治)