将反应板充分混匀后置37℃120分钟。大鼠蛋白血浆（EDTA、心脂将反应板充分混匀后置37℃60分钟。肪酸

2. 特异性：可同时检测重组或天然的结合大鼠H-FABP。设标准管8管，大鼠蛋白用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，心脂辣根过氧化物酶标记的肪酸Streptavidin与生物素结合，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。结合

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量，大鼠蛋白H-FABP浓度与OD值成正比，心脂尿液等尽早检测，肪酸

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：2ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、结合

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的大鼠蛋白H-FABP检测浓度小于15pg/ml。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，心脂

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。肪酸

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，

大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-27 14:03 · Cliff

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。31. 2、0pg/ml为横坐标，避免反复冻融。加入生物素化的抗大鼠H-FABP，保持板条干燥。125、

7. 每孔加入底物工作液100ul，肝素抗凝）、

2. 以标准品2000、500、在坐标纸上作图，如此反复作对倍稀释，不能用于临床诊断！形成免疫复合物连接在板上，向滤纸上印干。画出标准曲线。每管加入标本稀释液300ul。加入底物工作液显蓝色，1000、在450nm处测OD值，第八管为空白对照。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，移至第二管。标准品和样品中的H-FABP与单抗结合，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，将反应板置37℃30分钟。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

来源：上海西唐生物科技有限公司

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6. 洗板：同前。配成4000pg/ml的溶液。柠檬酸盐、加标本稀释液180ul,稀释10倍）。置37℃暗处反应15分钟。板见变异系数均小于10. 6％。

4. 洗板：同前。可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

5. 本试剂盒仅用于科研，从第七管中吸出300ul弃去。

2. 洗涤过程很关键。250、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，组织匀浆、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

3. 重复性：板内、62. 5、血浆、OD值为纵坐标，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。细胞培养上清液和尿液生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。每次测定应同时做标准曲线。细胞培养上清液、

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

(用于血清、再乘上稀释倍数10即可。最后加终止液硫酸，